裸鼠成瘤實驗在腫瘤研究中具有不可替代的作用,它不僅可以揭示腫瘤的生物學特性,還可以為藥物研發(fā)和治療方案制定提供重要依據(jù)。
進行裸鼠成瘤實驗的原因主要有以下幾點:
研究腫瘤生物學特性:人體腫瘤移植于免疫缺陷的裸鼠體內(nèi)后,能保持其生物學特性,可以觀察和研究腫瘤細胞在體內(nèi)的生長、轉(zhuǎn)移等生物學行為,這對于理解腫瘤的發(fā)生、發(fā)展機制具有重要意義。
評估腫瘤生長和侵襲能力:可以直觀地展示腫瘤在體內(nèi)的生長速度和侵襲范圍,為評估腫瘤的生長和侵襲能力提供直接證據(jù)。這對于制定和調(diào)整治療方案具有指導意義。
藥物敏感性研究:在裸鼠體內(nèi)形成的腫瘤模型可以用于研究人體腫瘤對藥物的敏感性。通過給予不同的治療藥物,觀察腫瘤的生長變化,可以評估藥物的療效和毒性,為開發(fā)新的腫瘤治療方法和藥物提供重要的實驗數(shù)據(jù)。
易于控制和重復實驗:裸鼠作為模型物種,具有易于維護、繁殖數(shù)量大、易存活等特點。這使得實驗條件易于控制,實驗結(jié)果易于重復,從而提高了實驗的可靠性和準確性。
裸鼠成瘤實驗中的細胞準備與接種:
細胞狀態(tài):確保所選用的細胞處于對數(shù)生長期,細胞密度達到80~90%左右時收集。收集細胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基,確保細胞處于良好的生長狀態(tài)中。細胞活性是影響實驗結(jié)果的關鍵因素,必須選用活性高的腫瘤細胞,并避免使用已長時間傳代的細胞。
細胞消化與洗滌:使用胰酶消化細胞后,用預冷的PBS洗滌兩遍,以清除殘留的血清和胰酶。洗滌過程中應輕柔操作,避免對細胞造成損傷。
細胞懸液制備:將細胞沉淀用PBS或無血清培養(yǎng)基吹打至合適的濃度。
接種技巧:
1.接種前將細胞懸液充分吹散,防止細胞成團。
2.選擇血供豐富的部位進行接種,如腋窩中后部。接種時針頭應深入皮下約1cm,并在皮下左右滑動幾次,使細胞接種成團。
3.接種后應輕輕按壓接種部位,防止細胞懸液從針眼溢出。
4.為減緩細胞凋亡,整個接種過程應將細胞懸液置于冰上。
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